强直性脊柱炎的诊断需抽血化验HLA-B27，血沉，C反应蛋白，做骶髂关节CT或MR，然后结合临床表现(腰和(或)脊柱、腹股沟、臀部或下肢酸痛不适，或不对称性外周寡关节炎、尤其是下肢寡关节炎，症状持续≥6周，夜间痛或晨僵明显，活动后缓解，足跟痛或其他肌腱附着点病)。才可作出诊断。HLA-B27属于人体白细胞相关抗原，它虽然是诊断强直性脊柱炎的特异性指标，但不能单纯依靠HLA-B27指标来诊断强直性脊柱炎，还需要结合患者临床症状、体征、影像学检查及其他实验室检查。HLA-B27阳性者只可能提示罹患强直性脊柱炎的机率增大。